O QUE É DIAGNÓSTICO GENÉTICO PRÉ-IMPLANTAÇÃO (PGD)?

Desenvolvimentos recentes em genética permitem que estudos genéticos sejam realizados em embriões desenvolvidos por métodos de fertilização in vitro. Este método é chamado de 'diagnóstico genético em embrião' ou 'diagnóstico genético pré-implantação'. Esses processos são realizados removendo 1 ou mais células dos embriões que se desenvolvem como resultado da fertilização de óvulos com espermatozóides em laboratório.

Usando métodos especiais nas células retiradas, pode-se fazer o diagnóstico de distúrbios cromossômicos numéricos e estruturais e doenças monogênicas (como talassemia, anemia falciforme, fibrose cística) dos futuros bebês que esses embriões irão desenvolver.

Qual é o objetivo do PGD?

Os indivíduos correm o risco de transmitir a doença hereditária que carregam para seus filhos em taxas diferentes. Por esta razão, é importante determinar doenças genéticas em casais e embriões para ter filhos saudáveis. O PGD realizado usando diferentes técnicas pode detectar muitas doenças hereditárias enquanto ainda estão no nível do embrião.

Quais são as indicações para o diagnóstico genético pré-implantação?

Em casos de portadores de doenças genéticas;

• Distúrbios numéricos cromossômicos (anomalias cariotípicas; Síndrome de Down, Síndrome de Turner, Síndrome de Klineferter etc.)

• Anomalias estruturais (Translocações Recíprocas e Robertsonianas)

• Doenças de gene único (talassemia, fibrose cística e distrofia muscular de Duchenne etc.)

• Doenças ligadas ao X (ligadas ao cromossomo sexual)

Em grupos de pacientes inférteis;

• Tentativas repetidas de fertilização in vitro (> 3)

• Idade feminina avançada (> 37 anos)

• Fator masculino grave

• Perdas gestacionais recorrentes (> 3)

Quais são as vantagens do diagnóstico genético pré-implantação?

• "Embriões saudáveis" podem ser detectados como resultado de triagem genética realizada em embriões antes da transferência de embriões.

• Garante que o embrião se une ao endométrio e aumenta a chance de gravidez.

• Reduz o risco de aborto ao permitir a transferência de um embrião cromossomicamente normal.

• A família está protegida de traumas médicos e psicológicos devido à interrupção da gravidez.

• A tipagem tecidual em doenças hereditárias como talassemia, fibrose cística e DMD (Distrofia Muscular de Duchenne) oferece tratamento para o filho doente do casal que nasceu anteriormente.

• É um método diagnóstico muito mais útil e barato quando comparado aos problemas de saúde que as pessoas doentes enfrentam ao longo da vida, as dificuldades no tratamento de doenças e os altos custos do tratamento.

Quais são as doenças que podem ser detectadas pelo diagnóstico genético pré-implantação?

As doenças cromossômicas são divididas em dois grupos principais numericamente e estruturalmente. Em casais com anomalias cromossômicas numéricas, como síndromes de Klinefelter (46,XXY) e Turner (45,X0) ou distúrbios cromossômicos estruturais, como translocação e inversão, o PGD específico é aplicado durante a FIV para detectar a anomalia cromossômica presente no estágio de desenvolvimento embrionário. O PGD pode ser recomendado para casais com análise cromossômica normal. Em casos como perdas gestacionais recorrentes e tentativas repetidas de fertilização in vitro sem sucesso, os painéis PGD são usados ​​para detectar distúrbios cromossômicos originários de células reprodutivas, que permitem a triagem de cromossomos com a anormalidade mais comum (13, 18, 21, X e Y). Nos últimos anos, as técnicas de PGS tornaram-se preferidas em relação às técnicas de PGD em varreduras cromossômicas, pois fornecem resultados muito mais abrangentes e confiáveis ​​com a tecnologia em desenvolvimento.

As doenças de um único gene são mais difíceis de identificar na fase embrionária do que as doenças cromossômicas.Para o PGD, o sangue é retirado dos casais e a alteração do DNA que causa a doença, chamada mutação, deve ser determinada previamente.
Por esta razão, é necessário um estágio de preparação, chamado estágio de configuração, que geralmente dura de 1 a 2 meses, para poder examinar o estágio embrionário nos grupos de pacientes mencionados acima. Doenças de gene único hoje em dia; Com métodos como análise de sequência de DNA e análise de fragmentos, anemia mediterrânea (talassemia), fibrose cística, atrofia muscular espinhal (AME), hemofilia, distrofia muscular de duchenne (DMD) etc. Muitas doenças genéticas podem ser identificadas no nível do embrião.
A fase de configuração é concluída após a aprovação das mutações acima mencionadas, os 'marcadores informativos (informativos)' específicos da doença a serem usados ​​no processo de PGD em embriões são determinados, produzidos e testados. O uso de marcadores informativos específicos da família fornece o mecanismo de controle. Os embriões determinados como saudáveis ​​após a avaliação são transferidos para a futura mãe.

O QUE É A TRIAGEM GENÉTICA PRÉ-IMPLANTAÇÃO (PGS)?

As técnicas de PGS são uma forma de triagem holística usada para determinar se um embrião tem um número normal de cromossomos. Esta triagem é limitada a cromossomos específicos apenas para métodos PGD. Portanto, taxas de sucesso muito maiores foram alcançadas com as técnicas de PGS em anomalias cromossômicas, tanto em termos de gravidez clínica quanto em aumento das taxas de natalidade.

a-CGH (Rastreio Comparativo de Cromossomas)
É um método atual que detecta alterações na quantidade de DNA. Enquanto um número limitado de cromossomos pode ser escaneado com PGD (método FISH), que é um método de triagem genética que tem sido usado há muito tempo em aplicações de fertilização in vitro, 24 cromossomos podem ser escaneados com o método a-CGH. Este método é baseado na varredura de todo o gene com Oligonucleotídeo \ BAC array.

Com o método a-CGH, ​​possíveis anormalidades nos cromossomos podem ser detectadas devido a duplicações (aumento), deleções (perdas) e translocação (substituição) de portadores nos cromossomos. Ao mesmo tempo que permite a detecção de anomalias maternas e paternas, também permite a triagem de doenças de um único gene.

vantagens do a-CGH;
• As repetidas tentativas malsucedidas de fertilização in vitro dos pacientes são evitadas.
• Como esta técnica permite a varredura de todos os cromossomos (22 XY), sua confiabilidade é maior do que o método FISH.
• É menos arriscado em termos de monossomia e outros distúrbios cromossômicos numéricos complicados (aneuploidia) e, como mais células podem ser examinadas, oferece uma oportunidade de análise mais saudável em comparação com a biópsia embrionária no terceiro dia.
• A taxa de mosaicismo no blastocisto é menor que a do embrião do terceiro dia, proporcionando uma análise mais confiável.

NGS (Sequenciamento de Próxima Geração)

Com este método, anomalias estruturais e numéricas nos cromossomos podem ser detectadas por um sistema computadorizado comparando com um segundo DNA conhecido como normal após a amplificação do DNA. As sequências de fragmentos de DNA que passaram por vários processos são lidas separadamente para cada embrião e avaliadas com um algoritmo especial.

As vantagens do método NGS sobre o método a-CGH são as seguintes;

• Por ser um método de análise direta, é uma técnica que trabalha com maior sensibilidade.

• Enquanto a taxa de detecção de embriões de mosaico com a-CGH é de 5%, esta taxa está entre 15-30% com NGS (12% de mosaicismo pode ser observado mesmo em embriões que atingem o blastocisto).

• Embriões 'normais' definidos por NGS têm uma taxa de aborto mais baixa do que outros métodos de PGS.

• Obtêm-se maiores taxas de implantação (gravidez clínica) em comparação com o método a-CGH.

Como resultado, com o uso dos métodos de triagem genética acima mencionados, a transferência seletiva de embriões é fornecida e as taxas de gravidez aumentam significativamente.
Por fim, não esqueça que a determinação de qual desses métodos é o mais adequado para você será feita pela equipe de fertilização in vitro.