CHE COS'È LA DIAGNOSI GENETICA PRE-IMPIANTO (DGP)?

I recenti sviluppi della genetica consentono di eseguire studi genetici su embrioni sviluppati con metodi di fecondazione in vitro. Questo metodo è chiamato "diagnosi genetica nell'embrione" o "diagnosi genetica preimpianto". Questi processi vengono eseguiti rimuovendo 1 o più cellule dagli embrioni che si sviluppano a seguito della fecondazione degli ovociti con gli spermatozoi in laboratorio.

Utilizzando metodi speciali nelle cellule prelevate, è possibile effettuare la diagnosi di malattie cromosomiche numeriche e strutturali e malattie di un singolo gene (come talassemia, anemia falciforme, fibrosi cistica) dei futuri bambini che questi embrioni svilupperanno.

Qual è lo scopo della PGD?

Gli individui corrono il rischio di trasmettere la malattia ereditaria che portano ai propri figli a velocità diverse. Per questo motivo, è importante determinare le malattie genetiche nelle coppie e negli embrioni per avere figli sani. La PGD eseguita utilizzando diverse tecniche può rilevare molte malattie ereditarie mentre sono ancora a livello embrionale.

Quali sono le indicazioni per la diagnosi genetica preimpianto?

Nei casi con portatori di malattie genetiche;

• Disturbi cromosomici numerici (Anomalie del cariotipo; Sindrome di Down, Sindrome di Turner, Sindrome di Klineferter ecc.)

• Anomalie strutturali (Traslocazioni Reciproche e Robertsoniane)

• Malattie monogeniche (talassemia, fibrosi cistica e distrofia muscolare di Duchenne ecc.)

• Malattie legate all'X (legate al cromosoma sessuale)

In gruppi di pazienti sterili;

• Tentativi di fecondazione in vitro ripetuti ( > 3)

• Età femminile avanzata (> 37 anni)

• Fattore maschile grave

• Perdite ricorrenti in gravidanza ( > 3)

Quali sono i vantaggi della diagnosi genetica preimpianto?

• Gli "embrioni sani" possono essere rilevati come risultato dello screening genetico eseguito sugli embrioni prima del trasferimento dell'embrione.

• Assicura che l'embrione si attacchi all'endometrio e aumenta le possibilità di gravidanza.

• Riduce il rischio di aborto spontaneo consentendo il trasferimento di un embrione cromosomicamente normale.

• La famiglia è protetta da traumi medici e psicologici dovuti all'interruzione della gravidanza.

• La tipizzazione tissutale nelle malattie ereditarie come la talassemia, la fibrosi cistica e la DMD (distrofia muscolare di Duchenne) fornisce il trattamento per il bambino malato precedentemente nato dalla coppia.

• È un metodo diagnostico molto più utile ed economico rispetto ai problemi di salute che i malati affrontano nel corso della loro vita, alle difficoltà nella cura delle malattie e agli alti costi di cura.

Quali sono le malattie che possono essere rilevate dalla diagnosi genetica preimpianto?

Le malattie cromosomiche sono divise in due gruppi principali numericamente e strutturalmente. Nelle coppie con anomalie cromosomiche numeriche come sindromi di Klinefelter (46,XXY) e Turner (45,X0) o disturbi cromosomici strutturali come traslocazione e inversione, durante la fecondazione in vitro viene applicata una PGD specifica per rilevare l'anomalia cromosomica presente nella fase di sviluppo dell'embrione. La PGD può essere consigliata per le coppie con analisi cromosomica normale. In casi come aborti ricorrenti e ripetuti tentativi di fecondazione in vitro senza successo, i pannelli PGD vengono utilizzati per rilevare disturbi cromosomici originati dalle cellule riproduttive, che consentono lo screening dei cromosomi con l'anomalia più comune (13, 18, 21, X e Y). Negli ultimi anni, le tecniche PGS sono diventate preferite rispetto alle tecniche PGD nelle scansioni cromosomiche, poiché forniscono risultati molto più completi e affidabili con la tecnologia in via di sviluppo.

Le malattie del singolo gene sono più difficili da identificare allo stadio embrionale rispetto alle malattie cromosomiche.Per la PGD, il sangue viene prelevato dalle coppie e il cambiamento del DNA che causa la malattia, chiamato mutazione, deve essere determinato in anticipo.
Per questo motivo, per poter esaminare lo stadio embrionale nei suddetti gruppi di pazienti, è necessaria una fase di preparazione, denominata fase di set-up, che normalmente dura 1-2 mesi. Malattie monogeniche al giorno d'oggi; Con metodi come l'analisi della sequenza del DNA e l'analisi dei frammenti, l'anemia mediterranea (talassemia), la fibrosi cistica, l'atrofia muscolare spinale (SMA), l'emofilia, la distrofia muscolare di Duchenne (DMD) ecc. Molte malattie genetiche possono essere identificate a livello embrionale.
La fase di set-up è completata dopo che le suddette mutazioni sono state approvate, vengono determinati, prodotti e testati i "marcatori informativi (informativi)" specifici della malattia da utilizzare nel processo PGD negli embrioni. L'uso di marcatori informativi specifici della famiglia fornisce il meccanismo di controllo. Gli embrioni determinati per essere sani dopo la valutazione vengono trasferiti alla futura mamma.

CHE COS'È LO SCREENING GENETICO PRE-IMPIANTO (PGS)?

Le tecniche PGS sono una forma di screening olistico utilizzato per determinare se un embrione ha un numero normale di cromosomi. Questo screening è limitato a cromosomi specifici solo per i metodi PGD. Pertanto, sono state raggiunte percentuali di successo molto più elevate con le tecniche PGS nelle anomalie cromosomiche, sia in termini di gravidanza clinica che in aumento dei tassi di natalità.

a-CGH (screening cromosomico comparativo)
È un metodo attuale che rileva i cambiamenti nella quantità di DNA. Mentre un numero limitato di cromosomi può essere scansionato con PGD (metodo FISH), che è un metodo di screening genetico utilizzato da molto tempo nelle applicazioni IVF, 24 cromosomi possono essere scansionati con il metodo a-CGH. Questo metodo si basa sulla scansione dell'intero gene con l'array Oligonucleotide \ BAC.

Con il metodo a-CGH, ​​è possibile rilevare possibili anomalie nei cromosomi dovute a duplicazioni (aumento), delezioni (perdita) e traslocazione (sostituzione) portatori sui cromosomi. Sebbene consenta il rilevamento di anomalie sia materne che paterne, consente anche lo screening di malattie di un singolo gene.

vantaggi a-CGH;
• I ripetuti tentativi di fecondazione in vitro falliti da parte dei pazienti sono prevenuti.
• Poiché questa tecnica consente la scansione di tutti i cromosomi (22 XY), la sua affidabilità è superiore al metodo FISH.
• È meno rischioso in termini di monosomia e altri complicati disturbi cromosomici numerici (aneuploidia) e poiché è possibile esaminare più cellule, offre un'opportunità di analisi più sana rispetto alla biopsia embrionale del terzo giorno.
• Il tasso di mosaicismo nella blastocisti è inferiore a quello dell'embrione del terzo giorno, fornendo un'analisi più affidabile.

NGS (sequenziamento di nuova generazione)

Con questo metodo, le anomalie strutturali e numeriche sui cromosomi possono essere rilevate con un sistema computerizzato confrontandolo con un secondo DNA noto per essere normale dopo l'amplificazione del DNA. Le sequenze di frammenti di DNA che hanno subito vari processi vengono lette separatamente per ogni embrione e valutate con uno speciale algoritmo.

I vantaggi del metodo NGS rispetto al metodo a-CGH sono i seguenti;

• Trattandosi di un metodo di analisi diretta, è una tecnica che funziona con una sensibilità maggiore.

• Mentre il tasso di rilevamento degli embrioni a mosaico con a-CGH è del 5%, questo tasso è compreso tra il 15 e il 30% con NGS (il mosaicismo del 12% può essere osservato anche negli embrioni che raggiungono la blastocisti).

• Gli embrioni "normali" definiti da NGS hanno un tasso di aborto inferiore rispetto ad altri metodi PGS.

• Si ottengono tassi di impianto (gravidanza clinica) più elevati rispetto al metodo a-CGH.

Di conseguenza, con l'uso dei suddetti metodi di screening genetico, viene fornito il trasferimento selettivo degli embrioni e i tassi di gravidanza sono notevolmente aumentati.
Infine, non dimenticare che la determinazione di quale di questi metodi è giusto per te sarà effettuata dal team di fecondazione in vitro.