ПРЕИМПЛАТАНЦИОННАЯ ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЭМБРИОНОВ (ПГТ)

ПРЕИМПЛАТАНЦИОННАЯ ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЭМБРИОНОВ (ПГТ)

переносить в полость матки пациентки только здоровые образцы.
Диагностика данного вида заключается в нахождении ‘’поломок’’ в гене,приводящих к моногенным заболеваниям( талассемия,муковисцидоз,фенилкетонурия и проч.)

Если у родителей есть генетические нарушения или другие отклонения в здоровье,то необходимо протестировать эмбрион прежде,чем имплантировать его в матку.Проведение ПГТ позволяет избавить будующего ребенка от наследственных семейных болезней.

ПГТ представляет сабой самую точную и безопасную методику предотвращения генетических и хромосомных заболеваний у ребёнка. Кроме того повышает вероятность успешной имплантации и снижает риск осложнений беременности.

ПОКАЗАНИЯ К ПРИМЕНЕНИЮ ПГТ

Рождение детей с генетическими аномалиями в анамнезе

Носительство генной мутации супругами

Частые выкидыши/ неразвивающиеся беременности

Возраст старше 38 лет

Безрезультатные попытки ЭКО при отсутствии видимых негативных факторов.

Существует несколько методов преимплатационной диагностики

Преимплатационная диагностика эмбриона методом ARRAY-CGH-

Эта генетическая диагностика проводится с помощью современного метода сравнительной гибридизации на микрочипах(array comparative genome hybridizatıon)

Array-CGH-метод одновременного исследования всех хромосом для определения их количественных и качественных аномалий. Благодаря этому иследованию можно исключить у будущего ребенка развитие синдрома Дауна, синдрома Эдвардса,синдрома Шерешевского-Тернера, а также ряд других хромосомных патологий,которые сопровождаются физическими пороками развития и выраженной умственной отсталостью.

Этот метод проводится при;

• Старшем репродуктивном возрасте женщины

• Мужском факторе бесплодия,связанном с нарушением спермогинеза

• Привычном невынашивании беременности

• Повторных неудачных попытках ЭКО.

Как проводится :

Исследование методом сравнительной гибридизации на микрочипах проводится в рамках программ ЭКО на 5 день культивирования эмбриона,когда он достигает стадии бластоцисты. На

данном этапе развития эмбрион состоит из внешнего слоя клеток(трофектодермы) и внутренней клеточной массы,из которой в будущем будут формироваться органы и ткани плода.

Процедура взятия клеток для генетического исследования называется биопсия эмбриона. С помощью микроинструментов эмбриолог аккуратно забирает несколько клеток трофектодермы. После этого эмбрион замораживают на срок выполнения исследования

Процесс генетической диагностики эмбриона методом array-CGH автоматизирован: анализ проводят компьютерные программы,а результат представлен в электронном виде. Интерпритацию этого исследования проводит врач-генетик. По результатам анализа отбирают генетически здоровый эмбрион и после медикаментозной подготовки пациентки ,эмбрион размораживают и проводят эмбриотрансфер.

Преимплатационная диагностика методом ПЦР

Преимплатационная генетическая диагностика эмбриона ПГТ,методом ПЦР позволяет исключить развитие у ребенка моногенных заболеваний. Моногенные заболевания имеют наследственную природу и обусловлены мутацией одного гена. К таким заболеваниям относят альфа- или бета- талассемию,спинальную мышечную атрофию,мышечную дистрофию, муковисцидоз,нейросенсорную глухоту и т.д

Полимерная цепная реакция(ПЦР)-это методика генетического исследования, направленная на выявление специфических копий ДНК эмбриона,говорящих о наличии патологии. Она позволяет амплифицировать(размножать) ДНК и ее фрагменты, увеличивая количество копий за несколько часов в миллионы раз,для дальнейшего анализа

ЭТОТ МЕТОД ПРОВОДИТСЯ ПРИ:

Старшем репродуктивном возрасте женщины

Хотя бы один из супругов является носителем хромосомной или генетической патологий

У мужчины нарушен спермогенез

У женщины в анамнезе есть более 2 случаев выкидышей

В семье уже есть ребёнок с моногенным хромосомным заболеванием

В анамнезе пары есть неудачные попытки ЭКО.

КАК ПРОВОДИТСЯ ПГТ МЕТОДОМ ПЦР

Исследование эмбриона проходит в рамках протокола ЭКО. Оплодотворенную яйцеклетку помещают в инкубатор, через 5 дней культивирования эмбрион достигает стадии бластоцисты.

Биопсия проводится на 5 день развития эмбриона. Эмбриолог с помощью микроинструментов забирает для анализа несколько клеток трофектодермы. Клетки эмбриобласта,которые в будущем станут основой для формирования органов плода, не затрагиваются. Поэтому биопсия безопасна для эмбриона и не нарушает естественый процесс его развития. После взятия клеток на анализ эмбрионы замораживают. Полученный материал отправляют в генетическую лабораторию.

Исследование методом ПЦР происходит в следующем порядке:

-Денатурация ДНК с целью раскручивания её двойной нити.

-Амплификация количества генетического материала(за счет добавления к фрагментам ДНК специфических ферментов)

-Исследование нуклеотидов на предмет дефектных зон.

Метод ПЦР позволяет получить точные данные о структуре генов и фрагментов ДНК эмбриона при наличии минимального количества биологического материала.

По результатам ПГТ выбирают наиболее перспективные эмбрионы и после предварительной медикаментозной подготовки пациентки один из них размораживают и переносят в матку.

Преимплатационная диагностика методом NGS (Next generation sequencing)

Этот метод проводится при:

Старшем репродуктивном возрасте женщины

В анамнезе присутствуют случаи невынашивания беременности

У пары выявлен мужской фактор бесплодия, обусловленный нарушением спермогенезе

Отсутствии положительных результатах при нескольких попытках ЭКО.

ПОРЯДОК ВЫПОЛНЕНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ЭМБРИОНА МЕТОДОМ NGS

Преимплатационная диагностика эмбриона проводится в рамках программы ЭКО

Она позволяет выбрать эмбрион с нормальным хромосомным набором(эуплоидный эмбрион) пригодный к переносу в матку.

КАК проводится ;

Биопсия проводится на 5 сутки развития эмбриона,когда он достигает стадии бластоцисты. Эмбриолог выполняет биопсию с помощью микроинструментов, аккуратно забирая для исследования несколько клеток трофектодермы. При этом не затрагивается внутренняя клеточная масса эмбриона. После биопсии эмбрионы замораживаются, на срок необходимый для анализа.

Как только будет известен результат исследования, принимается решение о последующем этапе.

Перед разморозкой женщина проходит медикаментозную подготовку, затем эуплоидный(здоровый)эмбрион размораживается и имплантируется в матку пациентки.

Анализ позволяет исключить вероятность таких хромосомных и наследственных заболеваний,как синдром Дауна,синдром Тернера, синдром Эдвардса, синдром Клайнфельтера,синдром Патау, а так же моносомии и трисомии,которые могут быть причинами неудачной имплантации эмбриона и выкидыша.

ПРЕИМПЛАТАЦИОННАЯ ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЭМБРИОНА МЕТОДОМ FISH.

Fluorescence in situ hybridization(FISH) является одним из методов преимплатационной генетической диагностики .

Этот метод проводят в рамках программы ЭКО.

FISH диагностика сочетает в себе преимущества цитологических, цитогенических и новейших молекулярных методов. Объектом исследования являются уникальные нуклетидные последовательности конкретной хромосомы или её отдельного участка.

Транслокация-наиболее частые структурные хромосомные перестройки,которые фенотипически не проявляются у носителей. Транслокации могут приводить к бесплодию,невынашиванию беременности,мертворождению или ранней детской смертности,рождению детей с хромосомными аномалиями.

Метод позволяет определять анеуплоидии 13,15-18,21,22 хромосом, а также X- и Y- хромосом и обнаруживать хромосомные перестройки.

Преимплатационная генетическая даагностика методом FİSH проводится при:

Старшем репродуктивном возрасте женщины

У мужчины обнаружено нарушение в спермогенезе

У женщины в анамнезе присутствуют 2 и более неудачных попыток ЭКО или более 2 случаев невынашивания беременности.

Процедура ПГТ методом FİSH выполняется на 5 день развития эмбриона,что позволяет получить более точную и подробную информацию о его хромосомном наборе.

ПРЕИМУЩЕСТВА МЕТОДА:

Исследуются все эмбрионы,достигшие стадии бластоцисты.

Возможен забор большего количества клеток для исследования без вреда для эмбриона.

Низкий риск мозаицизма эмбриона(за счет механизма самокоррекции)

Высокий коэффициент имплантации эмбрионов

ПОРЯДОК ВЫПОЛНЕНИЯ ПГТ МЕТОДОМ FİSH:

Метод позволяет проводить гибридизацию как метафазных так и интерфазных хромосом с помощью различных ДНК-зондов. Зонды являются клонированными последовательностями или выделенными участками ДНК, которые комплементарны участку ДНК исследуемого образца. ДНК-зонды помечены флюоросцирующими веществами.

Образец для исследования получают на 5 день развития эмбриона путём забора биопсии из трофектодермы. Образец отправляют в генетическую лабораторию,а эмбрионы замораживаются.

Специалист генетической лаборатории анализирует полученные данные после проведения исследования и составляет заключение о наличии/отсутствии хромосомных транслокаций и анеуплодий. После медикаментозной подготодки пациентки, здоровый эмбрион размораживается и производится имплантация в матку.

Reference : http://www.genetiks.com.tr